摘要

本文案例分析了Thermo Scientific Varioskan LUX多功能酶標儀（以下簡稱Varioskan LUX）及其氣體控制模塊在細胞動力學測量中的應用。通過這項技術，研究者能夠在控制CO2和O2濃度的環境中進行長時間細胞培養和動力學分析，從而提高了實驗的準確性和效率。

Varioskan LUX多功能酶標儀

Varioskan LUX是一款多功能酶標儀，能夠進行吸光度、熒光強度、化學發光、時間分辨熒光和AlphaScreen等五功能檢測。其氣體控制模塊能夠同時控制CO2和O2水平，為細胞培養提供一致的生理條件。

技術背景

在藥物和學術研究中，基于細胞的檢測通常需要精確控制CO2和O2的濃度。Varioskan LUX的集成氣體控制模塊可以在長時間動力學研究中維持細胞培養的生理條件，確保數據的連續性和準確性。

▲Variskan LUX 多功能酶標儀中的氣體濃度

在SkanIt軟件中很容易被調整和監控

 ▲Nunc Edge?96孔板帶有填充的邊緣，

可作為被動濕度控制

實驗方法

細胞在37℃和5% 的CO2條件下根據標準程序培養并傳代，使用細胞培養箱（Thermo ScientificTMHeracellTM150）進行培養。每孔含1000個細胞，用90微升培養基接種到兩個96孔板中；在加入PrestoBlue試劑（10微升）前，先在培養箱中孵育2小時。

PrestoBlue試劑是一種即用型細胞可滲透的瑞沙脲基溶液，它利用活細胞的還原能力作為細胞活力指示劑，定量測量細胞增殖。當加入到細胞時，PrestoBlue試劑被活細胞的還原環境修飾并高度熒光化。這種顏色變化可以通過熒光來檢測。

在測量室中保持溫度為37℃，CO2濃度為5%，用Varisikan Lux儀器每小時測一次熒光（激發波長560nm，發射波長590nm，底讀），測72小時。 同時進行未控制CO2水平的實驗作為對照。

▲有或沒有CO2控制的情況下，在Varioskan LUX儀器中進行了HeLa細胞72小時的動力學生長研究。繪制了熒光值減去基線48個重復的平均曲線圖。

▲在為期72小時的測量期間，VarisKan LUX儀器中的二氧化碳含量保持穩定。SkanIt軟件在每個測量的運行日志中記錄氣體濃度。

實驗結果

實驗結果表明，在Varioskan LUX儀器中控制CO2水平對于長時間動力學細胞檢測至關重要。使用PrestoBlue試劑，研究者能夠監測活細胞在72小時生長期內的增殖情況。結果顯示，在CO2控制條件下的HeLa細胞顯示出顯著的增殖，而在未控制CO2的條件下，熒光信號變化不顯著。

結論

Varioskan LUX的集成氣體控制模塊為細胞動力學測量提供了多項優勢，包括節省實驗臺空間、無數據間隙、通過SkanIt軟件輕松調整氣體濃度、同時或分別控制CO2和O2、良好的氣體濃度穩定性以及運行時氣體濃度記錄的可追溯性。

應用案例分析

Varioskan LUX多功能酶標儀在細胞動力學測量中的應用，展示了其在生物醫學研究中的高效性和實用性。通過精確控制細胞培養環境，研究者能夠獲得更可靠和準確的實驗數據，從而推動科學發現。