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    小動物活體成像的應用

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    概述

    ?小動物活體成像技術因具有直接觀測、可同時觀測多個實驗動物,對同一個研究個體可進行長時間反復跟蹤成像又不需殺死動物等優點,故被廣泛應用于生命科學研究領域。目前,小動物活體成像主要采用生物發光熒光兩種技術。



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    原理

    生物發光通過轉基因技術,將熒光素酶基因標記受體細胞或DNA,利用其產生的蛋白酶與相應的底物發生生化反應,在生物體內產生光信號(自發光,其信號的發射不需要外部光源激發)。

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    熒光技術采用熒光報告基因( GFP、RFP)或熒光染料進行標記,利用報告基因產生熒光蛋白或染料產生的熒光,在生物體內形成光源(需要外部能量激發)。

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    (熒光技術原理)


    名稱

    優點

    缺點


    生物發光

    ①高靈敏度;②低背景;③方便、成本低。
    ①標記手段和標記物單一;②低空間分辨率;③作用時間短。


       熒光技術

    ①高靈敏度;②標記物選擇多,標記方式更靈活;③方便、成本低。

    ①相對低空間分辨率;②熒光染料可能有毒性。


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    應用

    小動物活體成像技術廣泛應用于包括癌癥、炎癥、免疫疾病、神經疾病、心血管疾病、代謝疾病、新藥研發等各個研究領域。

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    舉例:

    1.不同治療方案對小鼠結腸癌腹腔轉移模型的效果比較

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    2.皮膚移植(干細胞治療)領域的應用

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    (表皮移植4天后,IVScope 8500成像,曝光時間5min)


    3.肺腫瘤研究領域的應用 

    4周齡雌性Nod/Scid免疫缺陷小鼠,尾靜脈注射A549肺癌細胞,5周后用IVScope 8200系統檢測,檢測前10min腹腔注射底物熒光素,并注射4%水合氯醛麻醉。

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    4.不同部位腫瘤模型鑒定

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    5.熒光標記物示蹤(Ex735/Em810熒光通道)

    DiR染料標記293細胞,尾靜脈注射后拍攝(左右二列間隔半小時拍攝;第一行均為對照組,第二行均為實驗組)

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    實驗組解剖后拍攝(肝臟、肺、脾臟有明顯信號)

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    6.視神經損傷模型鑒定

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    7.腫瘤模型構建(生物發光)

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    8.腦膠質瘤模型的鑒定

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    勤翔小動物活體成像系統

    IVScope8000系列小動物活體成像系統,是上海勤翔推出的高靈敏度、多功能活體成像系統。它采用一級背部感光薄化超低溫CCD相機、搭配特殊設計的暗箱、自動加熱樣品臺及專業的圖像處理軟件等,能滿足客戶的多種實驗需求。





    硬件特色

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    ①可選配薄化背照式制冷CCD相機,量子效率至高可達95%;   

    CCD相機至低制冷溫度可達-100℃;    

    ③F0.8超大光圈,保障足夠進光量,保障微弱信號也能捕捉到;

    ④隔絕外界光線的封閉暗箱設計,在正常實驗室光照條件下即可成像;

    ⑤6組熒光光源和濾光片組合可供選擇,至多能夠同時裝載5組。觀測范圍涵蓋了紫外、可見光及近紅外波段,使得市面上幾乎所有的熒光染料都可以使用。

    電動升降樣品臺,3檔位置可調,滿足不同視野大小的成像要求。至多可以同時滿足5只小鼠的成像需求;

    ⑦樣品臺具有恒溫加熱功能,至大程度保障所有實驗數據是在小動物的正常生理狀態下測得;

    ⑧可選配氣體麻醉系統,方便實驗操作;

    ⑨支持外接980nm/808nm激光器,搭配鵝頸管支架,滿足用戶對于上轉換熒光實驗的需求。           

    軟件特色

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    (小動物活體成像系統軟件界面)

    ①實時監控:可通過預覽功能在軟件窗口對樣品進行實時檢測; 

    ②圖像連續采集:通過軟件設置曝光時間和連續幀數,連續拍攝一組圖像而不會錯過短暫熒光或生物發光信號,拍攝結果自動保存;

    ③圖像編輯:具有圖像的旋轉、裁剪、反色等處理功能,進行圖像優化處理;

    ④偽彩疊加:調色板色彩豐富,讓用戶可根據自己的使用習慣疊加偽彩,從而大大增加肉眼對灰階圖像的視覺分辨能力;

    ⑤軟件算法強大:可對ROI區域進行分析,并具有圖像批處理功能;

    ⑥預置拍攝參數:自動保存及讀取拍攝參數,避免拍攝時重復設置參數;

    ⑦ 模塊控制功能:可通過電腦實現對系統每個模塊的控制,包括對升降臺、熒光系統和濾鏡輪的控制;

    ⑧支持以動態視頻形式輸出實驗結果。



    助力科研-IVScope客戶應用論文

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    1.Near-Infrared Light-Controlled and Real-Time Detection of Osteogenic Differentiation in Mesenchymal Stem Cells by Upconversion Nanoparticles for 

    Osteoporosis Therapy.doi. org/10.1021/acsnano.2c02900


    2.Near-Infrared Light-Controlled Activation of Adhesive Peptides Regulates Cell Adhesion and Multidifferentiation in Mesenchymal Stem Cells on an Up-Conversion Substrate.doi.org/10.1021/acs.nanolett.1c04534


    3.A novel near-infrared xanthene-based fluorescent probe for detection of thiophenpl in vitro and in vivo.doi:10.1039  /d0nj03370g      


    4.A near-infrared phosphorescent iridium(Ⅲ)complex for fast and time-resolved detection of cysteine and homocystenine. doi:10.1039/C8AN01107A

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    5.A Near-Infrared Xanthene Fluorescence Probe for Monitoring Peroxynitrite in Living Cells and Mouse Inflammation Model.doi:10.1039/C8AN01107A


    6.Development of near-infrared xanthene fluorescence probe for the hinghly selective and sentive detection of cysteine. doi:10.1016/j.dyepig.2019.107563


    7.A time-resolved near-infrared phosphorescent iridium(Ⅲ) complex for fast anf highly specific peroxynitrite detection and bioimaging applications.doi:10.1039/c9tb01673b


    8.pH-responsive delivery of H2 through ammonia borane-loaded mesoporous silica nanoparticles improves recovery after spinal cord injury by moderating oxidative stress and regulating microglial polarization.Regenerative Biomaterials,doi.org/10.1093/rb/rbab058 

    轉載:江西立康 公眾號 鏈接:https://mp.weixin.qq.com/s/GjeDtwM_ov7IIq_ufDU9ag

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