紫外-可見(jiàn)（UV-Vis）分光光度計(jì)通過(guò)測(cè)量紫外和可見(jiàn)光波段的光吸收對(duì)樣品進(jìn)行定量和鑒定。分光光度計(jì)的歷史前身可以追溯到1814年，當(dāng)時(shí)約瑟夫·馮·弗勞恩霍夫（Joseph von Fraunhofer）（弗勞恩霍夫應(yīng)用研究促進(jìn)協(xié)會(huì)的贊助人）利用自己發(fā)明的分光光度計(jì)測(cè)量太陽(yáng)光并發(fā)現(xiàn)太陽(yáng)光譜中的574條暗譜線（弗勞恩霍夫線）。

而一臺(tái)商用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)是阿諾德·貝克曼在1941年推出的，該儀器利用石英棱鏡將鎢燈發(fā)出的光分離為吸收光譜，并利用光電管（光電二極管的前身）記錄信號(hào)。為了說(shuō)明光源和電子設(shè)備的背景影響，紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)量通過(guò)樣品的光的強(qiáng)度，并自動(dòng)減去背景，以提供代表樣品測(cè)定特性的精確讀數(shù)。

分光光度計(jì)發(fā)展到今天，已成為生命科學(xué)、醫(yī)藥科學(xué)、分析化學(xué)等領(lǐng)域重要的儀器。而超微量分光光度計(jì)的出現(xiàn)，讓分析所需的樣品量降低至微升級(jí)別，特別適合于生命科學(xué)珍貴樣品的的定量分析。Implen于2005年推出的Label Guard超微量比色皿，使任何用戶都可以在常規(guī)紫外分光光度計(jì)上進(jìn)行微量樣品測(cè)量，而2006上市的Nanophotometer?系列超微量分光光度計(jì)，標(biāo)志了“后分光“時(shí)代的開(kāi)始。

微量紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)與常規(guī)的分光光度計(jì)相比，有著不同的設(shè)備結(jié)構(gòu)，其特性是能夠于獲得全光譜分析結(jié)果，使得核酸、蛋白質(zhì)等樣品可被定量及分析。常規(guī)分光光度計(jì)常采用前置分光器（如光柵），使光源發(fā)出的復(fù)色光分光為單色光，這能夠讓入射光保持很好的單色性，單色光穿過(guò)樣品池產(chǎn)生吸收，由二極管或倍增管檢測(cè)器檢測(cè)光強(qiáng)度。當(dāng)光柵進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，就會(huì)有不同波長(zhǎng)的單色光逐一通過(guò)樣品池，這時(shí)就可進(jìn)行光譜掃描測(cè)量。

雖然在靈敏度、噪音、雜散光等方面具備優(yōu)勢(shì)，但光譜掃描所需的時(shí)間往往是較長(zhǎng)的，這并不太適合于生命科學(xué)樣品的定量及光譜分析。因此，目前市面上大多數(shù)的用于測(cè)量生命科學(xué)樣品的微量分光光度計(jì)采用的是相反的光學(xué)結(jié)構(gòu)，即“后分光”形式。

由氙燈光源發(fā)出的復(fù)色光，通過(guò)樣品（微量或比色皿樣品），在相應(yīng)的波長(zhǎng)下分別產(chǎn)生吸收，減弱的復(fù)色出射光通過(guò)分光器進(jìn)行分光，后由陣列式檢測(cè)器同時(shí)檢測(cè)所有波長(zhǎng)對(duì)應(yīng)的吸光值。陣列式檢測(cè)器通常為CCD，為長(zhǎng)條形結(jié)構(gòu)，每個(gè)像元組能夠精確的檢測(cè)對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)。因此，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)恼f(shuō)，微量分光光度計(jì)的全光譜測(cè)量，是無(wú)需“掃描“的”，而是同時(shí)獲得的。

因此，微量分光光度計(jì)的核心部件中，氙燈替代了鎢燈氘燈組，后分光結(jié)構(gòu)替代了前分光結(jié)構(gòu)，陣列式CCD檢測(cè)器替代了光電二極管檢測(cè)器。在同時(shí)，也完全能夠滿足樣品測(cè)量準(zhǔn)確性的要求，可謂是為大分子定量分析量身定制的儀器。而Nanophotometer?出眾的全光譜測(cè)量性能，也廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)領(lǐng)域。

后分光的結(jié)構(gòu)還有其優(yōu)勢(shì)，由于分光器是固定的，無(wú)需轉(zhuǎn)動(dòng)進(jìn)行光譜掃描，因此波長(zhǎng)的穩(wěn)定性是非常好的。而掃描式分光光度計(jì)必須考慮分光器轉(zhuǎn)動(dòng)導(dǎo)致的波長(zhǎng)漂移問(wèn)題，需要定期檢測(cè)或調(diào)整。在后面幾期我們將介紹儀器的檢定問(wèn)題，會(huì)具體介紹。

無(wú)論是前分光，還是后分光，都各具特點(diǎn)，也適合于不同的應(yīng)用需求。充分的了解構(gòu)造和原理，有助于您合理的選擇和正確的使用儀器。德國(guó)Implen 18年來(lái)一直專注于微量樣品吸光度測(cè)量領(lǐng)域，我們以豐富的制造和應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)為用戶提供有效的產(chǎn)品，也熱衷于分享知識(shí)與傳遞價(jià)值。Implen是值得您信賴的超微量品牌。