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結構生物學是生命科學的重要組成部分,主要研究生物大分子的分子結構和形成,探討生物大分子的作用機制和原理。通過了解結構的特點,深入理解蛋白質如何在生命活動中進行工作,進而為探尋疾病根源、設計新藥提供新路徑。短短幾十年發展歷史中,已有十余個貝爾獎頒給了結構生物學領域。結構生物學當前是生物學家感興趣的領域之一。
每個生物大分子都具有獨特的三級結構,這取決于每個分子的“一級結構”線性序列。理解分子的三級結構是研究功能的基本前提。生物分子太小,即使用光學顯微鏡也無法觀察。為了可視化大分子的結構,需要使用波長更短的輻射方法,以獲得足夠高的分辨率。蛋白質的結構生物學主要研究方法包括:
?質譜(MS)
?高分子晶體學(X射線/XRC)
?核磁共振波譜(NMR)
?電子順磁共振波譜(EPR)
?冷凍電鏡(cryo EM)
?電子結晶學和微晶電子衍射
?多角度光散射
?小角散射
?激光吸收光譜法(LAS)
浙江大學冷凍電鏡中心
Nanophotometer? NP80用于蛋白濃度測量
通常,所有這些方法都需要高純度的蛋白質樣品,以提供可靠和可重復的結果,并避免潛在偽影和雜質引起的誤導性觀察和錯誤。在進行精細的儀器分析之前,使用盡可能少量的樣本進行質量控制,是十分必要的的,可避免浪費珍貴的樣本和時間。
清華大學結構生物學創新中心《Cell Discovery》
Nanophotometer?用于測量純化后的ABCB6蛋白濃度
中科院生物物理所 生物大分子重點實驗室《Nature Plants》
Nanophotometer?NP80
用于測量光合作用PSI–LHCI–LHCII超分子復合物的光譜表征
藍色:野生型;綠色:ΔLhcbM1突變型;紅色:ΔLhcbM5突變型
Nanophotometer?作為微量樣品濃度測量的標準儀器,特別適用于珍貴的蛋白質樣品的分析。所采用的樣品壓縮技術,在檢測過程中無需形成液柱,避免了純化后的蛋白質樣品表面張力降低的問題,因而在蛋白質測量中具備優勢。此外,低僅需0.3μl的樣品體積即可進行進行測量,大幅節省了珍貴樣品。封閉的檢測環境避免了測量過程中樣品的揮發。樣品臺良好的化學兼容性,可測量含有多種有機溶劑成分的樣品(具體請遵循化學兼容性表)。另外,通過全光譜掃描功能,還可獲得不同突變體樣品的光譜學表征,以反映精細結構的改變。
Sample Control? 樣品質量控制功能,作為樣品質量監測手段,為研究人員提供了可靠的信息,樣品中存在的的污染物將被標記和提供信息。系統可通過A260/280比值對樣品純度進行評估,如比值在0.5和0.6范圍之間,表示蛋白質純度高,用于也可根據自己的要求定義閾值。
大多數情況下,結構生物學所分析的生物大分子來源于表達和純化的流程,Nanophotometer?豐富的功能也能應用于各個環節:
Implen Nanophotometer?已應用于清華大學結構生物學創新中心,浙江大學冷凍電鏡中心、中科院生物物理所生物大分子國家重點實驗室等結構生物學研究機構和制藥公司,廣泛應用于結構生物學領域的樣品表征和質控。如您有相關應用需求,Implen是值得您信賴的伙伴。